腦脊液檢查結(jié)合分子生物學(xué)檢測(cè)是確診的關(guān)鍵,病程急,診斷需爭(zhēng)分奪秒。
阿米巴食腦蟲(即福氏耐格里阿米巴)感染的檢查主要依賴于對(duì)患者腦脊液的分析,由于病情進(jìn)展極為迅速,早期準(zhǔn)確診斷至關(guān)重要。醫(yī)生通常通過腰椎穿刺獲取腦脊液樣本,對(duì)其進(jìn)行一系列檢查,包括直接顯微鏡觀察、培養(yǎng)以及先進(jìn)的分子生物學(xué)檢測(cè),以尋找或確認(rèn)福氏耐格里阿米巴的存在。
一、 腦脊液常規(guī)與生化檢查
腦脊液壓力與外觀 感染患者的腦脊液壓力通常顯著升高 。腦脊液外觀可能呈現(xiàn)膿性或血性,這與其中含有大量紅細(xì)胞和白細(xì)胞有關(guān) 。
細(xì)胞學(xué)與生化指標(biāo) 對(duì)腦脊液進(jìn)行化驗(yàn),可發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯增高,且以多形核白細(xì)胞為主 。蛋白質(zhì)含量增加,而糖含量則下降 。這些變化是原發(fā)性阿米巴腦膜腦炎的典型特征 。
檢查項(xiàng)目
福氏耐格里阿米巴感染特征
常見病毒性腦炎特征
腦脊液壓力
顯著增高
正常或輕度增高
外觀
膿性或血性
清亮或微渾
白細(xì)胞計(jì)數(shù)
顯著增高,以多形核白細(xì)胞為主
輕度至中度增高,以淋巴細(xì)胞為主
蛋白質(zhì)
增加
正常或輕度增加
糖含量
下降
正?;蜉p度下降
病原體培養(yǎng)
無菌(細(xì)菌培養(yǎng)陰性)
通常無菌
二、 病原學(xué)直接檢測(cè)方法
直接涂片鏡檢 這是快速但敏感性較低的方法。將新鮮的腦脊液離心后,取沉淀物在顯微鏡下直接觀察,有時(shí)可以發(fā)現(xiàn)快速移動(dòng)的阿米巴滋養(yǎng)體 。經(jīng)瑞氏-姬姆薩染色后,可更清晰地看到滋養(yǎng)體的形態(tài) 。
細(xì)胞培養(yǎng)法 將腦脊液或腦組織樣本接種到特定的培養(yǎng)基(如瓊脂平板培養(yǎng))中,利用阿米巴的特性進(jìn)行培養(yǎng),再通過顯微鏡觀察來鑒定 。此方法特異性高,但耗時(shí)較長(zhǎng)。
三、 先進(jìn)的分子生物學(xué)檢測(cè)
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR) 使用針對(duì)福氏耐格里阿米巴的屬和種特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,能快速、特異地檢測(cè)出樣本中的阿米巴DNA 。該方法比直接鏡檢更敏感、更準(zhǔn)確。
宏基因組高通量測(cè)序 (mNGS) 這是目前較為迅速且準(zhǔn)確的確診方法之一 。mNGS技術(shù)可以不依賴培養(yǎng),直接對(duì)腦脊液中的所有核酸進(jìn)行測(cè)序,從而無偏倚地鑒定出包括福氏耐格里阿米巴在內(nèi)的各種病原體,尤其適用于病因不明的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染 。
免疫學(xué)與組織學(xué)檢查 由于原發(fā)性阿米巴腦膜腦炎病程極快,患者往往在七天內(nèi)死亡,體內(nèi)抗體來不及產(chǎn)生,因此免疫學(xué)檢測(cè)通常不準(zhǔn)確,一般不作為常規(guī)診斷手段 。免疫組織化學(xué)檢查可在腦組織活檢標(biāo)本中用于鑒定阿米巴 。
阿米巴食腦蟲的檢查是一個(gè)多步驟、多方法結(jié)合的過程,核心在于通過腰椎穿刺獲取腦脊液。盡管腦脊液的常規(guī)檢查能提供重要的線索,但最終確診依賴于在腦脊液或腦組織中找到阿米巴滋養(yǎng)體,或通過PCR、mNGS等分子技術(shù)檢測(cè)到其特異性遺傳物質(zhì)。鑒于該病病死率高且進(jìn)展迅猛,一旦臨床懷疑,應(yīng)立即進(jìn)行腦脊液檢查,并優(yōu)先采用mNGS或PCR等快速、高靈敏度的分子診斷技術(shù),以爭(zhēng)取寶貴的治療時(shí)間。